1. 雜質為異構體混合物（結構/手性/順反異構）

加標溶液里的雜質，如果本身為異構體（如順/反異構、手性對映體，或者位置異構體），而你的色譜分離方法對此類結構有分離能力，就會出現兩個峰（即“雙峰”）。

比如雜質A有A1和A2兩種異構體，標準品本身即為兩種結構的混合物，且色譜可以分開，自然呈現雙峰。

判斷方法：

查標準品說明書或MSDS，是否標明存在異構體（常見于雜質標準品或消旋體）。

查分析方法，是否為手性色譜柱、異構體分離優化條件。

2. 加標溶液中雜質純度不夠，含有副成分

雜質標準品若不夠純，含有部分降解產物或其它相關物質，這些組分和主雜質響應值接近，保留時間相近也會導致雙峰。

3. 方法參數/儀器原因

色譜流動相比例、柱溫或進樣方式欠優化時，存在峰分裂（不是兩個化學成分，而是一個組分在條件下分成兩峰）。

進樣量過大、柱頭活性點導致樣品部分吸附拖尾或者二次分布。

色譜柱出現輕微老化或污染，也會導致峰分裂。

4. 雜質發生互變/變構或基質影響

有的雜質如酮-烯醇互變，或者順反異構體比例隨溶液環境變化，或樣品溶劑促使雜質轉變，也可導致雙峰。

加標溶液溶劑與雜質發生物理/化學作用，雜質在系統中呈現不同狀態。

5. 其它特殊情況

雜質與基體中其它物質發生締合或弱反應，同一雜質以不同形式出峰。

標準品超期或儲存條件不佳產生分解產物。

加標操作不均（不同溶液間混雜導致）